CRISPR/Cas9是最新出現(xiàn)的一種基因進行編輯的技術，給揭示疾病發(fā)生機理以及靶向基因療法治愈遺傳疾病帶來了希望?；贑RISPR的T細胞編輯為免疫靶向癌癥、艾滋病以及先天性免疫缺陷等方向提供了新的治療方案，然而高效的編輯和改造T細胞一直以來是該領域一個巨大挑戰(zhàn)。

據(jù)悉，美國康奈爾大學Houston Methodist Hospital秦立東教授團隊在體外制備了CRISPR體系，通過其實驗室自主研發(fā)的微流控轉(zhuǎn)染技術平臺迅速將CRISPR體系傳遞到人類T細胞中，最終成功編輯了T細胞的特定基因PD-1。該方法利用微流泵驅(qū)動細胞穿過狹小空間，細胞受到物理擠壓產(chǎn)生形變并在細胞膜產(chǎn)生瞬時小孔，實現(xiàn)有效輸運基因編輯分子到細胞內(nèi)的作用。秦立東教授認為微流控芯片的細胞拉伸作用適合相對脆弱的細胞種類，比如干細胞和免疫細胞的編輯，而這些細胞很難經(jīng)受電穿孔等傳統(tǒng)方法的毀滅性操作；同時，相比現(xiàn)在應用較多的病毒感染細胞方法，該技術還避免了病毒DNA序列插入細胞基因組帶來的安全隱患。

秦立東教授課題組成功地敲除了了PD-1的表達，這一蛋白在新興的癌癥免疫治療領域吸引了眾多科學家的密切關注，研究證實采用一些藥物來阻斷PD-1可以誘導T細胞攻擊腫瘤。本文的第一作者韓欣博士認為此技術可以不斷優(yōu)化來實現(xiàn)更多類型細胞的基因編輯，對其在免疫治療領域的應用充滿信心。

微流控轉(zhuǎn)染技術是一個應用廣泛，高通量并能實現(xiàn)單細胞精確快速高效控制的新型細胞轉(zhuǎn)染平臺，與CRISPR基因編輯技術的有效結合為人類疾病基因治療提供了重要策略。

文章信息：

Xin Han，Zongbin Liu，Yuan Ma，et al. Cas9 Ribonucleoprotein Delivery via Microfluidic Cell-Deformation Chip for Human T-Cell Genome Editing and Immunotherapy. Advanced Biosystems.